同学们，我们将进行神经肌肉标本的制备实验。请同学们做好预习，观看视频，完成以下讨论题目，让我们课堂上的实操更加的有的放矢。
我们课堂上见！
实验书上P29-31
实验讨论题目：
1、如何完成双毁髓？如何判断双毁髓成功？
2、坐骨神经-腓肠肌标本包含什么？制备实验步骤分几步？
3、在解剖过程中有哪些课本中提及的注意事项？为什么要尽量避免金属器械触摸神经？
4、如何检验标本制备成功？
参考视频：来源优酷
[实验目的]
1．学习蛙类动物双毁髓的实验方法。
2．学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
[实验原理]
见课本P29页
[材料与器械]
见课本P29页
[实验步骤]
（1）双毁髓的方法（请简要概述）
（2）剥皮、去躯干及内脏（方法二选一）
实验课本方法：将双毁髓的蟾蜍用中式剪在腋窝水平横断躯干，左手拇指和食指捏住脊柱的断端，右手持手术剪在胸腹部纵向剪开皮肤，用组织镊或手术剪小心除去内脏（应尽量避免金属器械触及腹后壁的神经），此时看见脊柱及其两侧的神经。然后用右手向右后方撕剥皮肤，将剥制完成的标本放入盛有任氏液的培养皿中。清洗手及手术器械。
个头大的动物参考方法：将双毁髓的蟾蜍腹面向上放入蜡盘中，左手持手术镊轻轻提起腹壁皮肤，右手持手术剪将皮肤剪开，再剪开腹壁肌肉。然后用手术镊轻轻提起内脏，自基部剪断（勿伤脊神经）。左手轻轻托起蟾蜍后肢，使头部及内脏向下，看清支配后肢的脊神经发出部位，于其前方剪断脊柱、剥皮。洗净双手和用过的器械，再进行以下操作。
（3）分离两后肢将去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上，脊柱端在左侧。用左手拇指及食指压住标本的股部两侧肌肉，右手持手术刀于耻骨联合处向下按压刀刃，切开耻骨联合。然后用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉组织，并纵向剪开脊柱（尾杆骨留在一侧），使两后肢完全分离。也可不用手术刀切开耻骨联合，而用左手托起标本，右手持金冠剪直接剪开耻骨联合。注意：操作要十分小心，切勿剪断坐骨神经。将分开的后肢，一只继续剥制标本，另一只放入任氏液中备用。
（4）分离坐骨神经将一侧后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外侧翻转，使其足底朝上，用固定针将标本固定在玻璃板下面的蛙板（木板或硬泡沫塑料板）上。用玻璃解剖针沿脊神经向后分离坐骨神经。股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经。坐骨神经基部（即与脊神经相接的部位），有一梨状肌盖住神经，用玻璃解剖针轻轻挑起此肌肉，便可看清下面穿行的坐骨神经。剪断梨状肌，完全暴露坐骨神经与其相连的脊神经。再用玻璃解剖针轻轻挑起神经，自前向后剪去支配腓肠肌之外的分支，将坐骨神经分离至腘窝处。用金冠剪剪去脊柱骨及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。取下脊柱端的固定针，用手术镊轻轻提起脊柱骨的骨片，将神经搭在腓肠肌上。
（5）游离腓肠肌：用玻璃针将腓肠肌和胫腓骨分离开，用手术刀片或玻璃分针将腓肠肌跟腱与胫腓骨分离开一段，用手术镊在腓肠肌跟腱下穿线并结扎，提起结扎线，剪断跟腱与胫腓骨的联系，游离腓肠肌。
（6）分离股骨头左手捏住股骨，沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，用金冠剪自膝关节向前刮干净股骨上的肌肉。保留股骨的后2/3，剪断股骨。剪去膝关节下部的后肢，保留腓肠肌与股骨的联系，制备完整的坐骨神经-腓肠肌标本。标本应包括：坐骨神经、腓肠肌、股骨头和一段脊柱骨四部分。
（7）用锌铜弓检验标本左手持手术镊轻轻提起标本的脊柱骨片，使神经离开玻璃板，右手持经任氏液蘸湿的锌铜弓，使其两极接触神经，如腓肠肌发生收缩，则表示标本机能正常。右手提起腓肠肌上的结扎线，轻轻将标本放入任氏液中（切勿使神经受牵拉），稳定15-20min，即可进行实验。
（8）制备坐骨神经干标本按上述方法分离另一侧后肢坐骨神经。坐骨神经在腘窝处分为内侧的胫神经和外侧的腓总神经两支，用玻璃分针沿胫神经和腓总神经主干走向将神经分离至踝部，剪断侧支。
结扎坐骨神经脊柱端及胫神经和腓总神经足端，游离神经干即制成坐骨神经干标本。
[实验中应注意事项]
1.制作标本过程中，要尽量避免金属器械、手、蟾蜍腹腔体液等接触坐骨神经。
2.制备标本过程中经常用任氏液湿润去皮的标本，防止干燥
3.不能夹捏和过度牵拉神经
4.不能误剪坐骨神经到腓肠肌前后的两条分支。
5.所留股骨不能过短。
6.注意操作过程中不可将剥皮的标本同皮肤、内脏等弃物放在一起。
参考资料：
蛙坐骨神经及腓肠肌图示
蛙坐骨神经-腓肠肌标本及坐骨神经干标本制备
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